以NK细胞为效应细胞，以肿瘤细胞（可为原代肿瘤细胞或肿瘤细胞株）为靶细胞，将效应细胞与靶细胞按10:1（数目比）的比例加入96 孔U型板中，每孔含靶细胞1×10^4 cells，终体积为200 μL，设3个复孔。培养4 h，然后取培养上清，用乳酸脱氢酶 (LDH) 试剂盒（Promega；Catalog No.: G1780）检测效应细胞对靶细胞的杀伤率。

具体的操作流程如下：

技术原理：

CytoTox 96®非放射性细胞毒性检测是基于比色法的检测方法，可替代 51Cr 释放法。CytoTox 96®检测定量地测量乳酸脱氢酶(LDH)。LDH 是一种稳定的胞质酶，在细胞裂解时会释放出来，其释放方式与 51Cr 在放射性分析中的释放方式基本相同。释放出的 LDH 在培养基上清中，可通过 30 分钟偶联的酶反应来检测，在酶反应中 LDH 可使一种四唑盐(INT)转化为红色的甲臜(formazan)。 生成的红色产物的量与裂解的细胞数成正比。可见光吸光值数据可以用标准的 96 孔读板计收集。用四唑盐与心肌黄酶(diaphorase) 或其他电子接受体结合来测定 LDH 的方法已经应用多年(1)。有文献报道使用这种技术来测量自然的细胞毒性，得出的数值与用51Cr 释放法平行对照测定得出的数值完全相同(在实验误差之内)。