NK细胞的质量检测方法_苏州顶点生物医药有限公司

技术指导

NK细胞的质量检测标准：

1) 无菌检测	收获细胞前，取少量细胞悬液或上清进行细菌、真菌培养，并检测支原体及内毒素（标准：病原学检测阴性，内毒素<5 EU/mL）。
2) 细胞存活率检测	台盼蓝染色检测细胞存活率应高于90%。
3) 表型分析	流式细胞仪检测细胞表面CD3、CD56、CD16等分子的表型。一般CD3^-CD56⁺>50%，CD56⁺>60%，CD16⁺>60%。不同来源的样本最终获得的NK细胞表型比例存在差异。
4) 细胞杀伤实验	以NK细胞为效应细胞，以肿瘤细胞（可为原代肿瘤细胞或肿瘤细胞株）为靶细胞，将效应细胞与靶细胞按10:1（数目比）的比例加入96 孔U型板中，每孔含靶细胞1×10⁴cells，终体积为200 μL，设3个复孔。培养4 h，然后取培养上清，用乳酸脱氢酶 (LDH) 试剂盒（Promega；Catalog No.: G1780）检测效应细胞对靶细胞的杀伤率。